分光光度计是一种广泛使用的光学式分析仪器，为保证这种分析仪器的准确可靠，国家技术将其列为强检仪器，并先后颁布了各类分光光度计的检定规程。为了配合检定规程的实施，近年来各医学计量机构都相继配备了标准滤光片用于各类分光光度计的检定。但是，由于分光光度计的种类繁多，各种分光光度计其适用的检定规程及标准术光片也不尽相同，因此在具体检定过程中，部分计量人员往往感到难以开展或不能完成某台机器检定的全过程。下面就几种主要标准滤光片在分光光度计检定中的应用方法作一介绍。

1、镨钕滤光片和氧化钬滤光片

        镨钕滤光片和氧化钬滤光片是一种具有特征吸收峰(或透射峰)的波长标准物质，其吸收峰多而稳定，波长范围分别是: 400~900nm(镨钕滤光片)、200~700nm (氧化钬滤光片)，主要用于检定紫外、可见分光光度计的波长准确度与波长重复性，特别适用于具有自动扫描功能的分光光度计上述两项指标的检定。

        其检定方法是:①接通被检仪器电源,预热30分钟；②设置仪器参数：置仪器于波长扫描方式，带宽为2.0nm、响应速度“中”、数据方式为“吸光度”、波长范围为200nm~900nm;③不放任何样品对仪器进行99%基线校正;④将滤光片垂直放入样品架，以空气为参比进行波长扫描，测出吸收光谱;⑤利用仪器的数据处理功能找出滤光片的吸收峰值波长，根据规程要求在紫外光区内选1个峰值点，可见光区内选3个峰值点,连续测定3次。

        对于不具有自动扫描功能的仪器，在检定时也要先对仪器进行预热、校正，采用逐点测试法测定吸收峰值。手动扫描找点往往难以掌握,必须在吸收点上下反复多次才能确定。

2、杂散光滤光片

        杂散光是指射到仪器探测器上的与测试波长不同的其它波长的光,是分光光度计的重要误差来源之一,因此杂散光也是分光光度计的一项重要技术指标。此组滤光片共有4块,编号为：065-22、065- 38、065- 42、065一70,分别对应220nm、380nm、 420nm、700nm.其在对应的波长处的透射比等于零。所以选用某一杂散光滤光片所测定的被检仪器的透射比值,即为该仪器在测试波长下的杂散光。

       检定规程对不同的分光光度计的杂散光测定规定了相应的测试波长，紫外可见分光光度计的测试波长为220nm和 380nm，棱镜式可见分光光度计的测试波长为420nm和700nm，光栅式可见分光光度计的测试波长为380nm，因此在检定时必须根据不同的仪器选用合适的滤光片。具体方法是:①使被检仪器通电并预热30分钟;②设定仪器参数于光度测量方式、带宽为2.0nm ;③按要求设定波长,校正99%基线;④选合适的滤光片放入样品架,以空气为参比一次测定,其透射比读数即为被检仪器在测试波长下的杂散光。

        以上就几种主要标准滤光片对分光光度计的波长准确度、波长重复性、透射比正确度、透射比重复性、杂散光等5个重要技术指标的检定操作方法作了全面系统的介绍。并结合检定规程就测量数据的处理做了必要的说明,以方便出具《检定证书》。不同类型的分光光度计,均可根据相应的检定规程在进行以上5个重要指标检定时适用此方法。