HEK-293T细胞是293T（293tsA1609neo）细胞系（ATCC CRL-11268）的衍生物。细胞持续表达SV40抗原，该细胞常用于转染实验，转染效率较高。（转染一般以50%密度铺板，待细胞刚刚贴到皿壁上后（一般8-10小时），即可进行转染操作）

细胞特性

1） 来源：人胚胎肾脏

2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长，贴壁能力较弱

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5） 用途：仅供科研使用。

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。

2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。

3）半贴细胞和贴壁不牢（悬浮）细胞：T25瓶置于37℃培养箱中约2-3h，显微镜下观察细胞的情况，若细胞密度在60%以下，客户需收集T25瓶中的悬浮细胞离心后用wan全培养基重悬后打回到原培养瓶中继续培养，若细胞生长70%-90%对细胞进行传代，传代时需要收集培养基中悬浮的细胞离心后回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的wan全培养基来培养细胞。  收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代 。

HEK-293T人胚肾细胞/STR鉴定

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备DMEM（推荐iCell-0001）培养基；优质胎牛血清，10%；L-谷an酰胺（2mM）1%；NEAA  1% ； 双抗 1%

注意：1.该细胞贴壁能力较弱，培养时可酌情使用预铺0.2%明胶的培养瓶/培养皿。wan全培养液中需添加热灭活胎牛血清。细胞生长不能过密，过密细胞容易脱落，脱落下来的细胞可以通过离心收集，使用0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA 消化后继续培养。

2.如果发生293T细胞不贴壁，漂浮在培养基中的现象，请确认所使用的DMEM中碳suan氢钠浓度及培养箱中CO2浓度。并参考以下培养体系：

a) DMEM由1.5 g/L碳suan氢钠配制而成，使用5％CO2培养箱。

b) DMEM由3.7 g/L碳suan氢钠配制而成，使用10％CO2培养箱。

当使用碳suan氢钠含量高的培养基时，必须将这些细胞在10％CO2中孵育，以便正确缓冲培养基。当培养基没有适当缓冲时，239T细胞虽然可以存活，但将无法粘附并保持漂浮在培养基中。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90�S，10%DMSO，现用现配。