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miRNA定量检测的相关知识

2025年10月15日 13:43:36      来源:兴旺宝精选 >> 进入该公司展台      阅读量:7

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   MicroRNA是一类长度约19-24nt的非编码单链RNA,通过碱基互补配对的方式与靶基因的3'-UTR区部分或*互补,剪切靶基因的转录产物或者抑制转录产物的翻译,从而起到转录后调控靶基因表达的作用。它广泛存在于动物、植物、真菌及病毒的基因组中,调控生物体生长发育和疾病发生等过程中相关基因的表达。MiRNA的异常表达可能会导致生理状态的异常和疾病的产生,在多种癌症中,miRNA的表达水平会发生明显改变,有可能起到原癌基因和抑癌基因的作用。此外,在许多其他的病变组织和细胞中也检测到了miRNA的异常表达。因此对miRNA的表达的研究具有重要意义。
  MiRNA的实时定量PCR(Real-time quantitative PCR)检测
  运用成熟的实时定量PCR技术准确、快速地定量检测各种组织、原代细胞及细胞系中目的microRNA的表达情况,具有灵敏度高、实验周期短和特异性高等特点,实验结果见图1和图2。
  目的miRNA和内参(U6 snRNA)的扩增曲线
  目的miRNA和内参(U6 snRNA)的熔解曲线
  miRNA定量检测送样要求:
  细胞(≥106)、组织(≥300mg)、血液(≥1ml)、血清(≥1.5ml)等样品材料,总RNA(≥20μl,浓度≥ 50ng/μl)。
 
 
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