A.色谱柱的制备
- 该柱主要由填充有合适固定相的玻璃管组成。
- 在填充固定相之前，将*/棉绒或石棉垫放在色谱柱的底部。
- 包装后，将纸盘放在顶部，以免在引入样品或流动相时干扰固定层。
准备列有两种类型，它们是：
1.干包装/干灌装
在这种情况下，将所需量的吸附剂以干燥粉末的形式倒入色谱柱中，并使溶剂流过色谱柱直至达到平衡。
2.湿包装/湿填充
在这种情况下，制备具有流动相的吸附剂浆料并将其倒入塔中。被认为是包装的理想技术。
- 在使用色谱柱之前，应正确洗涤并干燥。
- 色谱柱也应无杂质，并用固定相均匀填充。
B.样本介绍
- 通常是组分混合物的样品溶解在**少量的流动相中。
- 整个样品立即被引入色谱柱，并被吸附在色谱柱的顶部。
- 从该区域，可以通过洗脱过程分离单个样品。
C.洗脱
- 通过洗脱技术，将各个成分从色谱柱中分离出来。
- 它可以通过两种技术来实现：
- 等度洗脱技术：在整个分离过程中，使用相同的溶剂组成或相同极性的溶剂。
例如。单独使用氯仿。
- 梯度洗脱技术：在分离过程中使用逐渐具有↑极性或↑洗脱强度的溶剂。
例如，**初是苯，然后是氯仿，然后是乙酸乙酯，然后是氯仿
D.组件检测
- 如果在柱色谱法中分离出的化合物是有色的，则可以简单地目视监测分离过程。
- 从柱色谱分离的化合物是否无色。
- 在这种情况下，将洗脱液的一小部分依次收集在标记的试管中，并通过TLC分析各组分的组成。
