2023年03月28日 11:42:15 来源:成都摩尔科学仪器有限公司 >> 进入该公司展台 阅读量:45
一、色谱柱使用前准备
首先我们需要仔细认真的阅读色谱柱的使用说明,了解色谱柱的规格型号种类。然后在选择合适的色谱柱。
在选择色谱柱的时候,我们需要根据分析样品的极性大小,化合物的种类数量以及结构特征。然后根据化合物的性质选择适合的色谱柱和色谱分析条件。不同种类的色谱柱它的流动相也是不用的。如果使用错误的流动相会导致色谱柱寿命降低,柱效降低,损坏柱子等情况。比如,我们要分析极性比较大的糖类物质的时候,***应该使用亲水性的色谱填料。对于刚买来的色谱柱。我们需要按照厂家的使用说明对色谱柱进行活化。因为活化后的色谱柱能够增加色谱柱的柱效,寿命等
2.样品的制备与预处理
经过多年的色谱分析。我们得到的一个经验***是样品纯化的越干净,那么色谱柱的使用寿命***会越长。很多的生物样品。因为它的组分复杂,所以对色谱柱的伤害是比较大的。如果不经过预处理直接分析样品的话,还会导致色谱柱的寿命降低。所以,在样品制备的时候我们需要对样品进行出来。才能使色谱柱用的更久。
2.1 制样溶剂的选择
制样溶剂通常需要考虑样品的溶解性、与流动相的相溶性、色谱填料的适用性等方面。这类溶剂需对样品有较大的溶解性,而且与流动相溶,洗脱强度******低于流动相或梯度洗脱中的起始流动相,以免影响样品分离。目前许多手性色谱柱都禁止使用DMSO、*、氯仿等溶解样品,这些溶剂会破坏固定相的结构,缩短色谱柱的使用寿命。此外,制样溶剂还应与色谱系统其他部件如高压泵、进样器等相适用。

2.2 制样溶剂过滤
在进样前需过滤样品溶液,如采用0.22μm的微孔滤膜除去不溶性微粒,以免堵塞柱头滤片及柱内填充床。在条件允许的情况下,******采用与色谱柱同种填料的固相萃取柱过滤进样溶液,可以减少在色谱柱上死吸附的物质或易堵塞的大分子样品。如生物样品中的小极性的油脂类易于沉淀死吸附在C18反相色谱柱中,导致柱效降低、柱压升高。采用SPE柱过滤后,可以有效减少在色谱柱中附着沉积的死吸附成分,保护色谱柱不被污染,******其使用寿命。
2.3 其他,如溶液浓度、进样量等
分析物的某些性质同样能影响色谱柱的使用寿命。强酸、强碱性物质和蛋白质类生物大分子,它们能与固定相填料作用,或生成不可逆吸附层,改变填料表面特征,使色谱柱性能发生变化,***终导致分离失效。此外样品的进样量过大、超载都会影响色谱柱的分离性能和使用寿命